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双链DNA检测工具—Pico488 dsDNA 定量试剂盒

发布时间:2024-05-31 分享到:

在许多生物学应用中,我们需要对微量的双链DNA(dsDNA)进行定量,如cDNA文库构建、亚克隆的DNA片段纯化、药物分子中DNA扩增产物的残留检测等。传统的核酸浓度检测方法是吸光度法,即通过在260nm(A260)处测量核酸的光吸收情况。然而,吸光度法存在一些弊端,例如样本中的单链核苷酸和单体核苷酸会产生干扰信号,样品中的杂质也会影响结果。此外,吸光法无法区分DNA和RNA,并且相对灵敏度较低(当A260值为0.1时,相应的双链DNA浓度为5μg/ml)。

为解决这些问题,我们今天向大家介绍一款创新的荧光法双链DNA检测工具——Pico488 dsDNA 定量试剂盒(货号:B1102),以及单独的Pico488 dsDNA 定量试剂(货号:42010)。Pico488是一种极为灵敏的荧光核酸染料,广泛应用于双链DNA的定量检测。无论是在cDNA文库构建、DNA亚克隆还是PCR产物的估测等领域,Pico488都具有重要意义。尤其是在疫苗等生物制品中,微量DNA的残留检测更是直接关系到人类的健康。

使用Pico488 dsDNA 定量试剂盒或单独的Pico488 dsDNA 定量试剂,您可以轻松准确地测定微量双链DNA的浓度。该荧光法不受单链核苷酸和单体核苷酸的干扰,还能区分DNA和RNA,并且具有极高的灵敏度。通过这一创新工具,您可以更加精准地进行DNA浓度测定,为各种生物学研究和应用提供可靠的支持。

 

Pico488仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至pg级别的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物,可用荧光分光光度计或荧光酶标仪读数,Ex/Em=503nm/525nm。


Pico488 dsDNA 定量试剂盒


Pico488 dsDNA 定量试剂盒(货号:B1102

Pico488 dsDNA定量试剂


Pico488 dsDNA定量试剂(货号:42010


产品优势:

相比传统的方法,如紫外吸光法(A260)、探针杂交法、Hoechst 33258染料法等,Pico488 dsDNA 定量具有以下优势:

①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,检测范围为:1pg/ul–5ng/ul,可节省宝贵的样品;

②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;

③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA;

④易于使用:只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于24和96孔板;与市面上的大多数荧光酶标仪和荧光计兼容;

⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

 

产品应用:

测定微量的DNA残留(如疫苗生产);对DNA样品进行精确定量


适用检测设备及建议上样量:

检测设备类型测定体积Pico488染料工作液体积DNA样本量
比色皿荧光计标准荧光比色皿 (3.5 mL)2 ml1 ml1 ml
其他荧光比色皿比色皿体积75%比色皿体积的37.5%比色皿体积的37.5%
平板荧光计96 孔板,每孔0.2 ml0.1 ml0.1 ml
24 孔板,每孔1 ml0.5 ml0.5 ml
其他规格的板子孔体积的75%孔体积的75%孔体积的75%
NanoDrop 3300*
0.1 ml0.05 ml0.05 ml

* 为了保持测量的准确性和精度,我们建议避免移液体积小于2ul。

 

检测结果展示:

Pico488光谱信息.jpg


Pico488光谱信息

Pico488染料特异性针对于dsDNA.jpg


Pico488染料特异性针对于dsDNA

试剂盒标准曲线.jpg


试剂盒标准曲线


引用文献赏析

1.Caza, F.; Granger Joly de Boissel, P.; Villemur, R.; Betoulle, S.; St-Pierre, Y. Liquid biopsies for omics-based analysis in sentinel mussels. PLoS One, 2019, 14(10), e0223525. doi: 10.1371/journal.pone.0223525

2.Crupi, A.N.; Nunnelee, J.S.; Taylor, D.J.; Thomas, A.; Vit, J.-P.; Riera, C.E.; Gottlieb, R.A.; Goodridge, H.S. Oxidative muscles have better mitochondrial homeostasis than glycolytic muscles throughout life and maintain mitochondrial function during aging. Aging, 2018, 10(11), 3327–3352. doi: 10.18632/aging.101643