高灵敏度 m6A RNA甲基化定量试剂盒

N6-甲基腺苷（m6A）是真核生物中存在的RNA分子中非常常见和丰富的修饰。m6A修饰由甲基转移酶复合物METTL3催化，并被最近发现的m6A RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5去除，后者以α-酮戊二酸（α-KG）和Fe6+依赖性方式催化m2A去甲基化。结果表明，METTL3，FTO和ALKBH5在许多生物过程中起重要作用，从发育和代谢到生育。m6A占所有RNA碱基甲基化的80%以上，存在于各种物种中。m6A主要分布在mRNA中，也存在于tRNA、rRNA和snRNA等非编码RNA中。mRNA转录本中m6A的相对丰度已被证明会影响RNA代谢过程，如剪接，核输出，翻译能力和稳定性以及RNA转录。由m6A RNA甲基化酶和去甲基化酶缺陷引起的异常m6A甲基化水平可能导致RNA功能障碍和疾病。例如，由于FTO突变患者的FTO活性增加，通过尚未确定的途径，靶mRNA中m6A水平异常低，导致肥胖和相关疾病的发作。RNA中动态和可逆的化学m6A修饰也可能作为一种具有深远生物学意义的新型表观遗传标记。因此，更多有用的信息可以更好地了解m6A RNA甲基化水平和RNA转录本上的分布，可能有益于疾病的诊断和治疗。

Epigentek EpiQuik m6A RNA甲基化定量试剂盒（比色法）是一种先进的m6A ELISA解决方案，提供一套全面的优化缓冲液和试剂，用于比色定量RNA中的N6-甲基腺苷（m6A或6mA）。它适用于使用从任何物种（如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒）分离的总 RNA 直接检测 m6A RNA 甲基化状态。

将m6A标准对照品以不同浓度加入测定孔中，然后使用EpiQuik m6A RNA甲基化定量试剂盒(比色法)(#P-9005-48)测量。

Epigentek为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案。2019年，Epigentek荣获“Bioz Rising Star TM ”,被评为2019表观遗传学领域的新星公司。

Epigentek EpiQuik m6A RNA甲基化定量试剂盒（比色法）七大特点：

1. 使用 m6A 抗体的比色 ELISA 样测定，步骤易于遵循，方便快捷。整个过程可以在3小时45分钟内完成。

2. 灵敏度高，其中检测限可低至10 pg的m6A。

3. 独特的结合溶液允许RNA >70 nts与孔紧密结合，从而能够定量来自mRNA和ncRNA（如tRNA，rRNA和snRNA）的m6A。

4. 优化的抗体和增强剂溶液可对m6A具有高特异性，在样品RNA的指定浓度范围内与未甲基化腺苷无交叉反应性。

5. 包括通用阳性和阴性对照，适用于定量任何物种的m6A。

6. 条孔微孔板形式使该分析灵活，可用于手动或高通量分析。

7. 简单、可靠且一致的检测条件。

原则与程序：

在该测定中，总RNA与使用RNA高结合溶液剥离孔结合。N6-甲基腺苷（m6A）使用特异性捕获N6-甲基腺苷抗体和检测抗体进行检测。检测的信号得到增强，然后通过在微孔板分光光度计中读取波长为450nm的吸光度来比色定量。m6A的量与测量的OD强度成正比。该试剂盒中提供阴性和阳性RNA对照。可以执行标准曲线（范围：0.02至1 ng的m6A）或可以使用单个量的m6A作为阳性对照。由于m6A含量可能因组织而异，也因正常和患病状态而异，或者在治疗和未处理的条件下会有所不同，因此建议运行重复样品以确保生成的信号得到验证。该试剂盒将允许用户量化m6A的绝对量，并确定两种不同RNA样品的相对m6A RNA甲基化状态。

部分文献：

Yao F et. al. (March 2024). The m(6)A regulator KIAA1429 stabilizes RAB27B mRNA and promotes the progression of chronic myeloid leukemia and resistance to targeted therapy. Genes Dis. 11(2):993-1008.

Huang L et. al. (December 2023). WTAP regulates autophagy in colon cancer cells by inhibiting FLNA through N6-methyladenosine. Cell Adh Migr. 17(1):1-13.

Huang T et. al. (December 2023). Comprehensive analysis of m(6)A methylomes in idiopathic pulmonary arterial hypertension. Epigenetics. 18(1):2242225.