Poly ADP-ribosylation(PAR)是真核细胞中一种重要的蛋白后修饰方式,通过向蛋白质添加多个ADP-核糖基团来调节蛋白质的活性和相互作用。这种修饰过程由聚(ADP-核糖)聚合酶(PARPs)和ADP-核糖转移酶2(ART2)介导,利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)作为底物。PAR链的生成在DNA损伤响应中扮演着关键角色,这些PAR链能够招募修复蛋白和染色质重塑因子,从而增强DNA修复过程。这一过程对于细胞的生存和功能至关重要,而其失调则与癌症、病毒感染和神经退行性疾病等疾病的发病机制相关。
最近,PARP家族成员的抑制剂显示出在某些癌症治疗中的潜力,特别是用于治疗BRCA突变的卵巢癌。在这一背景下,XDN-5114产品应运而生,为研究人员提供了一种有效的研究工具。
产品介绍
Poly (ADP-Ribose) ELISA 试剂盒是一种酶免疫测定方法,旨在快速检测和定量细胞或组织样本中的PAR水平。通过将未知样本的光密度与已知标准曲线进行比较,可以准确确定样本中的PAR含量。该试剂盒具有20 pM的检测灵敏度限制,每个试剂盒提供足够的试剂,可进行多达96次的分析,包括标准曲线和未知样本。
检测原理
Poly (ADP-ribose) ELISA 试剂盒采用夹心ELISA方法,用于定量测量PAR的含量。通过将样本或PAR标准加入涂有单克隆抗PAR抗体的微孔板中,加入相应的检测抗体和HRP偶联的二抗,再加入底物发生色度反应,最终通过测量吸光度来确定PAR含量。
试剂盒成分及使用方法
XDN-5114产品包含多种试剂,包括蛋白结合板、抗体、二抗、试剂稀释液等,用户可根据标准操作步骤进行试剂制备和样品处理。详细的使用说明可在产品说明书中找到。
结果示例
以下图表展示了典型的Poly (ADP-Ribose) ELISA结果。仅应将下面的数据用作参考,不应用于解读实际结果。
图:Poly (ADP-Ribose) ELISA标准曲线
图:HeLa细胞裂解物中的Poly (adp -核糖)水平。根据样品制备部分,在RIPA Buffer中添加或不添加PARP Inhibitor制备HeLa细胞裂解液。
阴性对照为裂解缓冲液,用于裂解细胞(无细胞)。
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