什么是qPCR?
实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR),是一项强大的分子生物学技术,用于准确测定样品中特定DNA或RNA序列的数量。与传统PCR相比,qPCR不仅可以扩增目标核酸序列,还可以实时监测荧光信号的变化。这种实时监测可以通过引入荧光染料或设计荧光标记探针的方式来实现。这些探针与PCR产物结合并产生荧光信号,其强度与PCR产物的数量成正比。通过监测荧光信号的变化,我们可以快速、精确地测定样品中目标序列的丰度。qPCR在基因表达分析、病原体检测、基因型确认等领域发挥着重要作用。
qPCR的优势在于其高度敏感性和准确性,能够实时监测PCR扩增过程,从而确定样本中初始靶分子的确切数量。这项技术被广泛应用在疾病诊断(如感染性疾病和癌症)、基因表达研究、遗传多态性分析、转基因生物检测以及环境微生物检测等多个领域。通过qPCR,科学家和研究人员可以对基因表达水平进行精确量化,并据此做出相应的生物学推断和结论。
qPCR的工作原理如下:
初始模板量:首先,需要一个初始的DNA模板,这个模板可以是基因组DNA或合成的DNA片段。
引物设计:设计特定的引物对目标DNA序列进行扩增。这些引物必须特异性地结合到目标序列的两端。
扩增过程:在PCR过程中,引物引导DNA聚合酶在模板上合成新的DNA链。这个过程包括反复的加热和冷却循环,以分离DNA双链并合成新的链。
荧光标记:qPCR的关键特点是在扩增过程中实时监测DNA的量。这通常是通过在引物或模板中加入荧光标记来实现的。荧光标记在DNA扩增时发出信号,随着扩增的进行,荧光信号强度增加。
数据分析:通过特定的软件分析荧光信号的变化,可以定量地计算出初始模板的拷贝数。
Jena Bioscience所有的冻干粉master mix均含有高质量的聚合酶和核苷酸,并经过优化以实现Z大的灵敏度和特异性:
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 补充说明 |
PCR-173S | qPCR SybrMaster Lyophilisate | 192 reactions × 20μl | 基于SYBR Green的检测的冻干制剂非常适合设置单重反应,无需进行大量的优化 |
PCR-173L | qPCR SybrMaster Lyophilisate | 960 reactions × 20μl | |
PCR-156S | qPCR ProbesMaster Lyophilisate | 192 reactions × 20μl | 对于包括双重或多重反应设置的TaqMan 检测,ProbesMaster 冻干制剂是首选 |
PCR-156L | qPCR ProbesMaster Lyophilisate | 960 reactions × 20μl | |
PCR-159S | SCRIPT RT-qPCR ProbesMaster Lyophilisate | 192 reactions × 20μl | 即用型冻干制剂,以干燥、室温稳定的形式提供,作为完整的RT-qPCR master mix使用 |
PCR-159L | SCRIPT RT-qPCR ProbesMaster Lyophilisate | 960 reactions × 20μl |
什么是LAMP?
等温扩增是一种在分析DNA和RNA时革命性的技术,其中Z突出的技术被称为LAMP(环介导等温扩增)。LAMP在恒定温度(60-65°C)下进行,因此不需要热循环。经过优化的Bst酶和master mix可以产生高达10^9倍的扩增因子,相当于PCR分析中的30个循环。这使得目标基因可以在10-30分钟内被检测到。
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 补充说明 |
PCR-398S | Saphir Bst GreenMaster Lyophilisate | 192 reactions × 20μl | LAMP检测可快速(10-20分钟)和超快速(5-10分钟)检测DNA。快速、简单和经济高效:无需昂贵仪器即可生成结果。 |
PCR-398L | Saphir Bst GreenMaster Lyophilisate | 960 reactions × 20μl | |
PCR-395S | Saphir Bst Turbo GreenMaster Lyophilisate | 192 reactions × 20μl | |
PCR-395L | Saphir Bst Turbo GreenMaster Lyophilisate | 960 reactions × 20μl |