生物样本中cAMP检测水平方案

cAMP是一种环状核苷酸，存在于动植物细胞和微生物中的微量。它被认为是细胞内的第二信使，与激素作为“第一信使”相对应。cAMP的生成受到腺苷酸环化酶的调控，而被磷酸二酯酶降解。因此，激活腺苷酸环化酶或抑制磷酸二酯酶可以增加细胞内cAMP的含量。研究表明，特异性抑制cAMP磷酸二酯酶的药物可用于治疗人类疾病。例如，cAMP封闭剂和增强β肾上腺素能受体已被用于治疗心率失调、高血压、心肌梗死等心脏疾病；而针对cAMP特异性磷酸二酯酶2/4的抑制剂正在进行认知增强方面的临床测试。因此，为了筛选出腺苷酸环化酶的激活剂或磷酸二酯酶的抑制剂，我们需要一个高敏感度、特异性且可重复的方案来检测cAMP的浓度。

目前市场上提供的一些cAMP检测试剂盒采用ELISA方案，使用的是非亲和纯化的cAMP抗体，因此特异性较差；另外，在某些组织中，cAMP的含量较低，传统的显色或发光方法的灵敏度也不理想。为此，我们向您介绍enzo的cAMP检测试剂盒，该试剂盒采用直接竞争酶联免疫法，具有高度灵敏的检测生物样本中cAMP水平的方案。首先，采用经过亲和纯化的cAMP抗体确保了检测的特异性；同时，在最后的显色步骤中采用了专利技术的乙酰化程序，显著提高了显色反应的灵敏度。

这是一种比色竞争性免疫测定试剂盒，用于定量测定在 0.1 M HCl 中裂解的细胞或组织中的细胞内 cAMP，用于阻止内源性磷酸二酯酶活性并稳定释放的环状 AMP。 然后将0.1M HCl处理的样品直接在微量滴定板中进行分析，无需提取，干燥和复溶。乙酰化（包括试剂）使灵敏度提高>10 倍。在405nm处读取吸光度。与竞争对手相比，大信噪比提供了更高的灵敏度。该试剂盒可让您轻松评估 GPCR 对腺苷酸环化酶的激活。   

cAMP检测试剂盒采用重组 Protein G包埋的96孔酶标板以高效锚定cAMP多克隆抗体分子，试剂盒内提供的cAMP-HRP偶联物直接与待测样本内cAMP竞争性的结合到酶标板的cAMP 抗体上。孵育并清洗后，结合到酶标板上的cAMP-HRP偶联物数量可以很方便的通过HRP显色底物等试剂在OD450nm处读取。这样OD450 nm的数值与样本内cAMP的含量呈负相关。

该cAMP检测试剂盒内包含了：cAMP检测缓冲液、cAMP标准品、中和缓冲液、乙酰化试剂A、乙酰化试剂B、亲和纯化兔源抗cAMP抗体、cAMP- HRP、HRP显色剂、Protein G包被的酶标板等9种试剂和配套产品，可用于100次分析。由于试剂盒提供了一种新颖的乙酰化程序显著地提高显色反应的灵敏度，其检测灵敏度可达到 0.1-10 pmol/5 μl (或者0.02-2 μM) 的cAMP。

Enzo的cAMP检测试剂盒步骤简单、操作快速并且方便，由于采用了一种新颖的乙酰化程序，因此其分析非常灵敏、稳定并且适合高通量应用。除了cAMP检测，我们还想您推荐Enzo的cGMP，以及其他如 钙蛋白酶Calpain、各种组织蛋白酶Cathepsin B/D/H/K/L/S等相关代谢分子的检测方案。

Enzo在开发和研究细胞凋亡检测分析、代谢检测方面具有卓越的影响力。包括检测各种检测分析试剂盒、相关特色抗体、重组蛋白及细胞因子和酶等多种产品，以及其他创新的研究工具。其产品覆盖细胞凋亡研究、能量代谢、细胞/组织蛋白提取、氧化应激与损伤、代谢与肥胖症、细胞增殖与毒性、信号转导、干细胞研究等领域。