永生化人皮下前脂肪细胞 (HNSA) - SV40T

名称：永生化人皮下前脂肪细胞（HNSA）-SV 40 T

生物体：人类（H. sapiens）

组织：脂肪

生长特性：粘附性，多边形

细胞类型：永生化细胞

储存条件：液氮的气相，或低于-130 ° C。

运输条件：用干冰运输。

产品格式：冷冻

预期用途：本产品仅供实验室研究使用。它不适用于任何动物或人类治疗用途，任何人类或动物消费，或任何诊断用途。

生物安全：II

检验报告：有关批次特定检测结果

生长条件：需要使用PriCoat™ T25培养瓶（G299）或Applied Cell Extracellular Matrix（G422）以使细胞粘附到培养容器上。PriGrow X系列培养基（TM 9269）+ 10% FBS + 1%青霉素/链霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO2。

永生化方法：携带SV40 T基因的慢病毒的连续传代和感染

解冻方案

1.在37°C水浴中快速解冻细胞，同时轻轻搅拌 （最多2分钟）。瓶盖应保持在水面以上 以尽量减少污染的风险。

2.通过喷洒和擦拭小瓶外部来净化小瓶 70%的乙醇。从这一点开始，所有的操作都应该 严格在生物安全柜内使用无菌 条件

3.将细胞悬液转移至15 ml无菌锥形管中 含有5 ml预热的完全生长培养基。细胞凋亡. 125 xg 5-7分钟。

4.吸出上清液，不要扰动细胞沉淀。 将细胞团重悬于推荐的预热、完全 生长培养基并分配到T25培养瓶中。

5.在推荐条件下孵育细胞。

传代培养方案

以下给出的数值适用于T75培养瓶;根据培养容器尺寸的要求按比例增加或减少体积。一旦培养容器80%汇合，对细胞进行传代培养。

1.吸出培养基，向培养容器中加入2- 3 ml预热的0.25%胰蛋白酶-EDTA。

2.在显微镜下观察细胞以确认分离（通常在2-10分钟内）。难以分离的细胞可以在37°C下放置几分钟以促进分离。

3.通过向培养容器中加入等体积的完全生长培养基来中和胰蛋白酶-EDTA。

4.将培养物悬液转移至无菌离心管中，以125 xg离心5分钟。实际离心持续时间和速度可能会因细胞类型而异。

5.吸出上清液，用预热的新鲜完全生长培养基重悬沉淀。根据需要，将适当等份的细胞悬液加入新的培养容器中。

6.在推荐条件下孵育细胞。