重组/突变AAV载体的识别取决于受重组/突变影响的特定衣壳区域。PROGEN的AAV ELISA中使用的捕获抗体结合特定且在某些情况下定义明确的构象表位。这些表位是由相应AAV血清型的衣壳组装产生的。ELISA可能识别您的重组/突变AAV载体的第一个迹象是抗体结合表位的存在。然而,衣壳蛋白的蛋白质序列的变化也可能影响蛋白质的构象,因此影响AAV衣壳上呈现的表位的构象。这可能影响抗体的结合亲和力,并影响基于AAV ELISA试剂盒提供的(非重组)试剂盒对照的滴度测定。由于这些特性强烈依赖于特定的重组/突变,PROGEN不能保证成功和精确定量您的重组/突变AAV载体。即使重组/突变AAV衣壳上仍然存在抗体结合表位,您的检测也需要针对您的特定AAV载体进行测试和优化。
PROGEN强烈建议生产和校准合适的(重组/突变)试剂盒对照,以确保使用PROGEN ELISA试剂盒可靠地确定您个别重组/突变AAV载体的滴度。
酶联免疫吸附试验(ELISA)原理:
该检测基于夹心ELISA技术,其中一种重组抗体,特异于组装好的AAV衣壳上的构象表位,被包被在板上,并用于从样本中捕获AAV颗粒。
捕获的AAV颗粒的检测是一个两步过程。
生物素偶联的重组抗体与捕获的AAV颗粒结合。
链霉亲和素过氧化物酶结合物与生物素分子反应。加入底物后会产生颜色反应,该反应与特异性结合的病毒颗粒的数量成正比。
作为PROGEN在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐PROGEN热销产品AAV2 滴度检测试剂盒 2.0R。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
AAV2 滴度检测试剂盒 2.0R | PRO-PRAAV2R | 查看 |
AAV2 滴度检测试剂盒 2.0R:
数量96次测试
反应性 AAV2
储存 2-8°C
用途 仅供研究使用
应用 ELISA
产品描述 独特的微孔板酶免疫测定,用于定量AAV2的病毒粒子和组装好的空衣壳。重组捕获抗体检测到的构象表位不存在于未组装的衣壳蛋白上。
试剂盒对照/标准 AAV2的空衣壳制剂
供应形式 试剂盒,12 x 8孔条状包装
AAV2 滴度检测试剂盒特点:
AAV2衣壳定量ELISA
完整和空AAV2衣壳的检测
A20R抗体用作捕获和检测抗体
AAV定量方法比较:
每种常用的定量方法都有其优缺点:
定量PCR(qPCR)广泛使用,但存在样本制备、引物设计或PCR效率等问题,可能导致实验室间结果的高变异性。
数字滴液PCR方法克服了qPCR的一些限制。然而,由于不同的样本处理协议,实验室间的差异仍然可能发生。
斑点印迹是一种简单且定量的方法,如果使用可靠的参考材料。然而,它受到一般西方印迹法线性和动态范围有限的影响。
鉴于上述技术的实用缺陷,传统的夹心ELISA目前在实验室间和实验室内变异性以及易用性方面似乎更优越。因此,它代表了可靠和可重复定量总rAVV衣壳滴度的最佳格式。
PROGEN公司成立于1983年,总部位于德国海德堡,由海德堡大学教授联合创办,体外诊断试剂的制造商和供应商,也是德国癌症研究中心的合作伙伴。 主要产品线: 经过质检验证的抗体、体外诊断产品、抗体噬菌体展示技术、密度梯度分离液和AAV(腺相关病毒)检测试剂盒等。
作为PROGEN在中国的经销商,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的PROGEN以及客户订制化服务。欢迎大家随时联系我们。