文献解读：PerKit 抗体 SN38 偶联试剂盒评估ADC的抗肿瘤效果

癌症转移是导致癌症致死的主要因素，而现有治疗手段并未针对转移性癌细胞进行专门设计。抗体药物治疗在癌症疗法中显示出极大的前景，它通过精确靶向癌细胞表面的特异性抗原，结合有效的治疗载荷或招募细胞毒性免疫细胞，从而提升治疗效果。例如，针对HER2的药物曲妥珠单抗显著改善了HER2阳性乳腺癌患者的预后，并有效抑制了癌症的复发。

Cadherin蛋白通过同型相互作用在细胞之间形成黏附连接，对于维持上皮组织的结构至关重要。然而，在癌症发展过程中，Cadherin蛋白常常出现失调，导致细胞迁移和侵袭性增强。上皮-间质转化（EMT）过程中，E-Cadherin（CDH1）通常会下调，而N-Cadherin和OB-Cadherin（CDH11）等间质型Cadherin则会被上调。

Douglas等人制备上皮E-Cadherin（CDH1）和间质OB-Cadherin（CDH11）的双特异性抗体23C6，发现它能有效克服肿瘤细胞的异质性，相关结果发表在PNAS上《Targeting breast and pancreatic cancer metastasis using a dual-cadherin antibody》

方法

1. 抗体生成与特性分析：

来源：23C6抗体源自针对CDH11细胞外结构域的杂交瘤。

序列分析：通过测序抗体可变区并建模潜在结合位点，发现两个高度保守的结合位点，分别与CDH1和CDH11具有高亲和力。

Western blot验证：23C6抗体能特异性识别重组人CDH11、人及鼠CDH1蛋白。

2. 模型验证与体内实验：

小鼠模型：使用同基因小鼠乳腺癌模型（4T1细胞）和异种移植模型（MDA-MB-231和PDAC9细胞），通过腹腔注射23C6抗体进行治疗。

疗效评估：监测原发肿瘤生长、肺转移负荷、循环肿瘤细胞（CTCs）数量及抗体毒性。

3. 毒性评估：

正常组织毒性：在免疫健全小鼠中评估23C6抗体对肾脏、肝脏、结肠等正常器官的影响。

组织学分析：通过HE染色和免疫组化评估组织损伤、细胞死亡和免疫细胞浸润。

4. 抗体药物偶联物（ADC）制备：

偶联方法：使用CellMosaic厂家的PerKit 抗体 SN38 偶联试剂盒(Cat# CM11408x1)将23C6抗体与SN-38（伊立替康的活性代谢产物）偶联。

效果评估：通过HPLC确认偶联成功，并在PDAC9小鼠模型中评估ADC的抗肿瘤效果。

实验

1. Cadherin表达异质性分析：

RNA-Seq数据：分析TCGA数据库中不同癌症类型的Cadherin家族成员表达情况，发现上皮癌中CDH1高表达，而其他Cadherin成员表达存在异质性。

CTC分析：通过单细胞RNA-Seq分析转移性乳腺癌患者的CTCs，发现CTCs中Cadherin表达具有高度异质性。

2. 23C6抗体对原发肿瘤和转移的影响：

原发肿瘤生长：在4T1和MDA-MB-231模型中，23C6抗体治疗对原发肿瘤生长无显著影响。

肺转移抑制：在切除原发肿瘤后，23C6抗体显著减少4T1和MDA-MB-231模型中的肺转移负荷。

CTCs减少：在PDAC9模型中，23C6抗体治疗导致循环中CTCs数量显著减少。

3. 毒性评估结果：

组织毒性：23C6抗体治疗未导致小鼠正常器官的组织损伤、细胞死亡或免疫细胞浸润增加。

体重与活动：抗体治疗小鼠的体重、活动量和器官重量与对照组无显著差异。

4. ADC的抗肿瘤效果：

细胞凋亡：在PDAC9模型中，23C6-SN38 ADC治疗导致肿瘤细胞凋亡显著增加，相比裸抗体和SN-38单体效果更佳。

结论

1. 23C6抗体的抗转移效果：

有效性：23C6抗体通过靶向CTCs中的Cadherin蛋白，有效抑制乳腺癌和胰腺癌模型的血液传播转移，而不影响原发肿瘤生长或正常组织。

机制：抗体可能通过减少CTCs在血液循环中的存活和/或外渗来抑制转移。

2. 安全性与耐受性：

无毒性：23C6抗体在正常小鼠中未表现出明显毒性，表明其具有良好的安全性。

3. 临床应用前景：

辅助治疗：在围手术期或寡转移性疾病中，23C6抗体可能作为辅助治疗手段，减少手术或标准治疗后的远处转移风险。

抗体药物偶联：23C6-ADC展示了增强的抗肿瘤效果，未来可进一步优化以提高治疗效果和安全性。

4. 未来研究方向：

机制研究：深入探讨23C6抗体在CTCs和早期转移灶中的作用机制。

临床应用：开展临床试验评估23C6抗体在不同癌症类型中的安全性和有效性。

Cell Mosaic的ADC偶联试剂盒的作用与价值

推动抗体药物偶联技术：

增强疗效：23C6-ADC展示了比裸抗体更强的抗肿瘤效果，为抗体药物偶联技术的发展提供了新的范例。

未来潜力：通过进一步优化ADC的设计和制造，有望进一步提高治疗效果和患者生存率。

综上所述，Cell Mosaic品牌的PerKit 抗体 SN38 偶联试剂盒 PerKit Antibody SN38 Conjugation Kit(Cat# CM11408x1)，在癌症转移治疗中展现了巨大的潜力和价值。其精准靶向治疗、良好的安全性和广泛的适用性为癌症患者带来了新的治疗希望，并有望推动个性化医疗和抗体药物偶联技术的发展。

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