Abbexa 小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒

小鼠催乳素（PRL）ELISA试剂盒是一种用于体外定量测量小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体中催乳素浓度的ELISA试剂盒。

艾美捷小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒：

货号：abx570351

靶标：催乳素（PRL）

反应性：小鼠

检测应用：ELISA

推荐稀释度：最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。

储存：运输时温度为4°C。收到后，请按照试剂盒说明书中的储存说明进行储存。

有效期：该试剂盒的有效期至少为6个月。根据要求可提供长达12个月的有效期。

稳定性：试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下，有效期内的损失率小于5%。为了尽量减少性能波动，操作程序和实验室条件应严格控制。还强烈建议整个检测过程由同一位用户完成。

检测范围：0.31 ng/ml 20 ng/ml

灵敏度：0.19 ng/ml

标准品形式：冻干

检测方法：比色法

检测类型：夹心法

检测数据：定量

样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体。

检测原理：该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附试验技术。96孔板上预先包被有抗体。将标准品、测试样本和生物素偶联试剂加入到孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂，并将整个板孵育。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。使用TMB底物来定量HRP酶促反应。加入TMB底物后，只有含有足够PRL的孔才会产生蓝色产物，加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的PRL量成正比。在微孔板读数仪中以450 nm波长光谱光度法测量OD，从而可以计算出PRL的浓度。

试剂盒组成：列出的试剂盒组成仅供参考。

预包被的96孔微孔板

标准品

标准品稀释缓冲液

洗涤缓冲液

检测试剂A

检测试剂B

稀释液A

稀释液B

TMB底物

终止液

板封膜

所需但未提供的材料：

37°C培养箱

多通道和单通道移液管及无菌移液枪头

喷雾瓶或自动微孔板洗涤器

1.5 ml管

蒸馏水

吸水滤纸

100 ml和1升量筒

微孔板读数仪（波长：450 nm）

ELISA振荡器

试剂准备：此程序仅供参考。

1) 标准品：用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示，用标准品稀释缓冲液对标准品溶液进行系列稀释。

2) 洗涤缓冲液：按照协议中的指示，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

3) 检测试剂准备：计算所需的工作溶液的总体积。分别用稀释液A和稀释液B将检测试剂A和检测试剂B稀释1:100。

检测程序：此程序仅供参考。产品说明书可能略有不同。产品应按照随产品一起提供的产品说明书中的说明使用。

1) 设置标准品、测试样本和对照孔。

2) 将100 ?l稀释后的标准品加入到标准品孔中。

3) 将100 ?l标准品稀释缓冲液加入到对照（零）孔中。

4) 将100 ?l稀释后的样本加入到样本孔中。在37°C下孵育90分钟。

5) 向每个孔中加入100 ?l检测试剂A。在37°C下孵育1小时。

6) 洗涤3次。

7) 向每个孔中加入100 ?l检测试剂B。在37°C下孵育30分钟。

8) 洗涤5次。

9) 向每个孔中加入90 ?l TMB底物。在37°C下孵育10-20分钟。

10) 加入50 ?l终止液。

11) 在450 nm处测量OD。

协议：此程序仅供参考。

在使用前将试剂盒组分和样本平衡至室温（18 25 °C）。建议每次测试绘制标准曲线。

1. 在预包被板上分别设置标准品、测试样本和对照（零）孔，然后记录它们的位置。建议每个标准品和样本至少重复测量两次。

2. 将100 ?L的每个标准品、对照和样本加入到相应的孔中。用盖子封住板，在37°C下孵育1小时。

3. 移除盖子并丢弃液体。

4. 向每个孔中加入100 ?l检测试剂A工作溶液。用盖子封住板，在37°C下孵育1小时。

5. 移除盖子并丢弃溶液。用1X洗涤缓冲液洗涤板3次。

6. 向每个孔中加入100 ?L检测试剂B工作溶液，封住并孵育37°C 30分钟。

7. 丢弃溶液并按照前一步骤用洗涤缓冲液洗涤板5次。

8. 向每个孔中加入90 ?l TMB底物。用盖子封住板，在37°C下孵育10-20分钟。避免暴露在光下。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过30分钟。

9. 向每个孔中加入50 ?L终止液。立即在450 nm处读取。

结果计算：计算时，将每个参考标准品和每个样本的O.D.450重复读数取平均值，并减去平均对照（零）O.D.450读数。标准曲线可以绘制为每个参考标准品溶液的相对O.D.450（Y）与各自标准溶液浓度（X）的关系。样本的PRL浓度可以从标准曲线上插值得出。

检测精密度：

批内精密度（同一批次内的精密度）：分别在一块板上测试3个低、中、高浓度水平的催乳素（PRL）样本，每个样本测试20次。

批间精密度（不同批次之间的精密度）：在3块不同的板上测试3个低、中、高浓度水平的催乳素（PRL）样本，每块板上测试8个重复样本。

CV（%）=（标准差/平均值）×100

批内精密度：CV<10%

批间精密度：CV<10%

数据示例：

图：显示小鼠催乳素（PRL）标准OD数据的图表