UBQ11|泛素(亲和纯化) UBQ11 | Ubiquitin

泛素是一种高度保守的调节蛋白，在所有真核组织中都有表达。最初，这种蛋白质被称为：泛在免疫造血多肽。其功能是通过泛素-蛋白酶体系统（UPS）标记蛋白质进行降解。

艾美捷UBQ11|泛素(亲和纯化)：

货号：AS08-307A

免疫原：重组拟南芥泛素（ubq11），带有N端His标签；TAIR编号：At4g05050

宿主：兔子

克隆性：多克隆

纯度：免疫原亲和纯化的血清，溶于pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）中。

形式：冻干

数量：50 ?g

复溶：使用前，每管加入20 ?l无菌水复溶。

储存：冻干品/复溶后储存于-20°C；复溶后请分装保存，避免反复冻融。打开前请短暂离心管子，以避免因物质粘附在管盖或管壁上而导致的损失。

测试应用：WB

推荐稀释度：1:10,000（WB）

预期 | 表观分子量：8.5 kDa

确认的反应性：拟南芥、大麦、窄叶豆、苹果、本氏烟、水稻、豌豆、马铃薯、玉米、葡萄

预测的反应性：短柄草、甘蓝型油菜、独行菜、异种曲霉、克莱门氏橘、甜橙、罗布斯塔咖啡、大花蕙兰、巨桉、红花油茶、大豆、野生大豆、红薯、苜蓿、稻瘟菌、烟草、菜豆、杨树、油桃、梨、蓖麻、黑种草、高粱、小麦、可可、葡萄

应用举例：

图：从3周龄的马铃薯（1）、1周龄的窄叶豆（2）、豌豆（3）、玉米（4）和大麦（5）叶片中提取10 ?g可溶性蛋白。提取缓冲液包含50 mM HEPES-KOH（pH 7.5）、330 mM山梨醇、2 mM EDTA、1 mM MgCl?、5 mM抗坏血酸和0.05%牛血清白蛋白。所有样品均与样品缓冲液混合，在70°C下变性5分钟，并在10% Tricine-SDS-PAGE上分离。蛋白质通过半干法转印至Hybond?-PVDF膜（Amersham Life Science），转印时间为30分钟，使用标准转印缓冲液并添加20%甲醇（Bio-Rad）。转印完成后，使用1%庞塞奥S染色检查蛋白质是否成功转印至膜上，随后进行封闭步骤。膜在室温下用封闭缓冲液（5%脱脂奶粉，1xPBS，0.1% Tween）孵育60分钟，期间不断搅拌。膜在室温下用一抗（稀释度1:5000）孵育，期间不断搅拌。弃去抗体溶液后，膜用PBS-T快速冲洗两次，随后在室温下用PBS-T洗涤一次15分钟，三次5分钟，期间不断搅拌。膜在室温下用二抗（山羊抗兔IgG，AS09 602，Agrisera）孵育1小时，稀释度为1:50,000，期间不断搅拌。膜用上述方法洗涤后，用Clarity Western ECL底物和ChemiDoc检测系统（Bio-Rad）显色5分钟。

UBQ11|泛素(亲和纯化)文献参考：

Li et al. (2024). Stress granules sequester autophagy proteins to facilitate plant recovery from heat stress. Nat Commun . 2024 Dec 30;15(1):10910. doi: 10.1038/s41467-024-55292-w.

Xie et al. (2024). Proteasome resides in and dismantles plant heat stress granules constitutively. Mol Cell. 2024 Sep 5;84(17):3320-3335.e7. doi: 10.1016/j.molcel.2024.07.033.

Jeran et al. (2021) The PUB4 E3 Ubiquitin Ligase Is Responsible for the Variegated Phenotype Observed upon Alteration of Chloroplast Protein Homeostasis in Arabidopsis Cotyledons. Genes (Basel). 2021 Sep 6;12(9):1387. doi: 10.3390/genes12091387. PMID: 34573369; PMCID: PMC8464772.

Filippi et al. (2019). Caspase-3-like activity and proteasome degradation in grapevine suspension cell cultures undergoing silver-induced programmed cell death. J Plant Physiol. 2019 Feb;233:42-51. doi: 10.1016/j.jplph.2018.12.003.

Krasuska et al. (2016). Nitric oxide-polyamines cross-talk during dormancy release and germination of apple embryos. Nitric Oxide. 2016 Nov 23. pii: S1089-8603(16)30178-1. doi: 10.1016/j.niox.2016.11.003. [Epub ahead of print].