AGO1属于一组精氨酸蛋白,是RNA砧骨沉默复合物(RISC)的催化成分。这种蛋白质复合物负责基因沉默(RNAi)。
艾美捷AGO1|Argonaute 1:
货号:AS09-527
免疫原:与KLH偶联的拟南芥AGO1(O04379,At1g48410)的N端肽段。
宿主:兔子
克隆性:多克隆
纯度:免疫原亲和纯化的血清,溶于pH 7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中。
形式:冻干
数量:50 ?g
复溶:复溶时加入50 ?l无菌水。
储存:冻干品/复溶后储存于-20°C;复溶后请分装保存,避免反复冻融。打开前请短暂离心管子,以避免因物质粘附在管盖或管壁上而导致的损失。
测试应用:染色质免疫沉淀(ChIP)、免疫荧光(IF)、免疫定位(IL)、小RNA免疫沉淀测序(small-RNA-IP-Seq)、西方印迹(WB)
推荐稀释度:2 ?g(ChIP),1:200(IF、IL、small-RNA-IP-Seq),1:5000-1:10,000(WB)
预期 | 表观分子量:116.4 | 130 kDa
确认的反应性:拟南芥、风信子、本氏烟
预测的反应性:白菜型油菜、独行菜、黄瓜、大豆、苹果、豌豆、蓖麻、番茄、马铃薯、葡萄
未反应的:莱茵衣藻、苜蓿、鼠尾草属植物、菠菜、水稻、菜豆、小麦、玉米
哺乳动物
应用举例:
图:80 ?g拟南芥可溶性全细胞提取物(提取缓冲液为20 mM Tris pH 7.5、5 mM MgCl?、2.5 mM DTT、300 mM NaCl、0.1% NP-40、1%蛋白酶体抑制剂MG132)在6% SDS-PAGE上分离,并转印至硝酸纤维素膜,转印时间为1小时。膜在TBS-TT(含0.25% Tween20和0.1% Triton-X)中用5%脱脂奶粉封闭1小时,随后用抗AGO1抗体(1:10,000,1小时)和二抗(山羊抗兔IgG,辣根过氧化物酶偶联,1:10,000,1小时)孵育。抗体孵育后用TBS-TT洗涤。所有步骤均在室温下进行,期间不断搅拌。膜用ECL-PLUS显色试剂显色5分钟,按照制造商的说明操作。曝光时间为5秒。
罗氏蛋白酶抑制剂混合物(不含EDTA)也可用于提取缓冲液。
感谢英国剑桥大学的Ericka Havecker博士提供支持。
AGO1|Argonaute 1文献参考:
Bressendorff et al. (2025). Importance of an N-terminal structural switch in the distinction between small RNA-bound and free ARGONAUTE. Nat Struct Mol Biol. 2025 Jan 7. doi: 10.1038/s41594-024-01446-9.
Nasfi et al. (2024). A pipeline for validation of Serendipita indica effector-like sRNA suggests cross-kingdom communication in the symbiosis with Arabidopsis. J Exp Bot . 2024 Dec 26:erae515. doi: 10.1093/jxb/erae515
Li et al. (2024). RNA helicase Brr2a promotes miRNA biogenesis by properly remodelling secondary structure of pri-miRNAs. Nat Plants . 2024 Oct;10(10):1532-1547. doi: 10.1038/s41477-024-01788-8.
Mirlohi et al. (2024). An AGO10: miR165/6 module regulates meristem activity and xylem development in the Arabidopsis root. EMBO J. 2024 May;43(9):1843-1869.doi: 10.1038/s44318-024-00071-y.
Martín-Merchán et al. (2024). Arabidopsis AGO1 N-terminal extension acts as an essential hub for PRMT5 interaction and post-translational modifications. Nucleic Acids Res . 2024 May 20:gkae387.doi: 10.1093/nar/gkae387.