Agrisera S6K1-2|核糖体蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化

核糖体S6激酶1/2（S6K1/2）参与TOR信号通路，参与渗透胁迫反应。被PDK1激活，在渗透胁迫下被抑制。在所有组织中表达，特别是在生长芽、根尖、叶缘和发芽种子的高代谢活动期间。替代名称：AtPK1/AtPK6 S6K1）、AtPK2/AtPK19（S6K2）。

艾美捷S6K1-2|核糖体蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化：

货号：AS13-2664

免疫原：与KLH偶联的肽段，含有磷酸化苏氨酸（phospho-Thr），来源于拟南芥S6K1（UniProt: P42818，TAIR: AT3G08730）和S6K2（UniProt: Q39030，TAIR: AT3G08720）。由于高度氨基酸同源性，所选肽段在这两种蛋白（S6K1和S6K2）中均保守。

宿主：兔子

克隆性：多克隆

纯度：免疫原亲和纯化的血清，溶于pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）中。

形式：冻干

数量：50 ?g

复溶：复溶时加入50 ?l无菌水。

储存：冻干品/复溶后储存于-20°C；复溶后请分装保存，避免反复冻融。打开前请短暂离心管子，以避免因物质粘附在管盖或管壁上而导致的损失。切勿在4°C下储存该抗体。

测试应用：西方印迹（WB）

推荐稀释度：1:500（WB）

预期 | 表观分子量：S6K1为52.6 kDa，S6K2为53 kDa | 60 kDa

确认的反应性：拟南芥

预测的反应性：甘蓝、盐芥

未反应的：目前尚未发现与预测反应性不符的已知例外。

应用举例：

从10天龄的拟南芥幼苗中提取30 ?g总蛋白，提取缓冲液为Lacus缓冲液，有或无磷酸酶抑制剂，并在变性前于4°C保存。样品在95°C下变性5分钟，随后在6.5% SDS-PAGE上分离，并转印至PVDF膜，转印时间为2小时。磷酸酶处理使用CIAP（“+”表示添加磷酸酶抑制剂，“-”表示未添加磷酸酶抑制剂）。膜在室温下用5%脱脂奶粉（TBST）封闭1小时，期间不断搅拌。膜在4°C下用一抗（稀释度1:500）孵育过夜，期间不断搅拌。弃去抗体溶液后，膜用TBST洗涤三次，每次15分钟，期间不断搅拌。膜在室温下用二抗（山羊抗兔IgG，辣根过氧化物酶偶联，Agrisera，AS09 602）孵育1小时，稀释度为1:10,000，期间不断搅拌。膜用上述方法洗涤后，用ECL显色5分钟，按照制造商的说明操作。曝光时间为几分钟。

感谢西班牙CRAG的Rossana Henriques博士提供支持。

其他信息（应用）：

蛋白质提取后，提取物必须立即进行SDS-PAGE电泳，不得冷冻。

S6K1-2|核糖体蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化文献参考：

Tanigawa et al. (2024). FYVE1/FREE1 is involved in glutamine-responsive TORC1 activation in plants. iScience. 2024 Aug 26;27(9):110814. doi: 10.1016/j.isci.2024.110814.  

Li et al. (2023). Mitigating growth-stress tradeoffs via elevated TOR signaling in rice. Mol Plant. 2023 Dec 5:S1674-2052(23)00396-9. doi: 10.1016/j.molp.2023.12.002.

Primo et al (2022). Plasma membrane H+-ATPases promote TORC1 activation in plant suspension cells. iScience. 2022 Apr 11;25(5):104238. doi: 10.1016/j.isci.2022.104238. PMID: 35494253; PMCID: PMC9046228.

Wang et al. (2022), FERONIA functions through Target of Rapamycin (TOR) to negatively regulate autophagy, Front. Plant Sci., 23 August 2022, Sec. Plant Cell Biology, Volume 13 - 2022, https://doi.org/10.3389/fpls.2022.961096