聚蛋白聚糖酶-1(ADAMTS-4,也称为软骨素酶-1)是解整合素和金属蛋白酶家族(ADAMTS)的重要成员,主要参与软骨素的降解。软骨素是软骨的主要结构成分,而ADAMTS-4在骨关节炎(OA)软骨的退化过程中发挥关键作用。因此,检测ADAMTS-4的活性对于研究骨关节炎的发病机制以及开发相关治疗药物具有重要意义。
SensoLyte 520聚蛋白聚糖酶-1活性检测试剂盒是一种基于荧光共振能量转移(FRET)原理的检测试剂盒,专用于连续测量ADAMTS-4的酶活性。该试剂盒采用5-FAM作为荧光团,TAMRA作为猝灭剂的FRET肽底物。在完整的FRET肽中,5-FAM的荧光被TAMRA猝灭;当ADAMTS-4切割FRET肽时,5-FAM的荧光得以恢复,并可在激发/发射波长为490 nm/520 nm处连续监测。荧光强度的增加与ADAMTS-4的活性呈正相关,且由于其较长的发射波长,该底物受测试化合物自身荧光的干扰较小。
艾美捷SensoLyte 520聚蛋白聚糖酶-1活性检测试剂盒:
货号:AS-72114
吸收波长(nm):490
发射波长(nm):520
储存条件:所有组分均需在-20°C下保存。组分A和B需避光并防潮。组分C和E可在室温下保存以便于使用。
应用:
荧光共振能量转移(FRET)
蛋白酶活性检测
生物标志物靶点:ADAMTS-4(软骨素酶)
检测方法:荧光法
检测下限:0.1 ng/ml
研究领域:细胞黏附与细胞外基质
子研究领域:细胞黏附蛋白
用途:仅限研究使用
优势与特点
高灵敏度:荧光法检测,灵敏度高,检测下限低至0.1 ng/ml。
特异性高:基于FRET原理,特异性检测ADAMTS-4活性,背景干扰低。
操作简便:采用96孔板格式,适合高通量筛选。
稳定性好:试剂盒组分在-20°C下保存,有效期长达2年。
实验结果示例
在一项实验中,使用该试剂盒检测A549细胞裂解液中的Phospho-p38,结果显示FRET底物被ADAMTS-4切割后,5-FAM荧光显著增加,表明试剂盒能够有效检测ADAMTS-4的活性。
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