抗磷丝氨酸/苏氨酸抗体研究广泛磷酸化蛋白翻译后修饰状态变化

特异性丝氨酸或苏氨酸残基的磷酸化是一种重要的翻译后修饰方式，用于调节大多数蛋白质的活性。多种细胞信号通路的激活可启动受体和非受体丝/苏氨酸激酶，这些激酶介导蛋白质的磷酸化修饰。能够检测磷酸化丝氨酸或磷酸化苏氨酸残基的抗体是研究广泛磷酸化蛋白翻译后修饰状态变化的绝佳工具。通过免疫沉淀法分离目标蛋白，随后使用抗磷酸化丝氨酸抗体检测磷酸化丝氨酸或磷酸化苏氨酸，是将磷酸化状态变化与蛋白质活性改变相关联的常用方法。

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抗磷丝氨酸/苏氨酸抗体：

物种反应性：人（Hu）、大鼠（Rt）、小鼠（Ms）  

亚型 ：IgG1

免疫原：PM3801磷酸化丝氨酸/苏氨酸抗体是由两种克隆混合而成：克隆M380A由磷酸化苏氨酸合成肽（偶联至载体蛋白）产生，克隆M380B由磷酸化丝氨酸合成肽（偶联至载体蛋白）产生。

缓冲液和储存：经蛋白A色谱纯化的鼠单克隆抗体，提供于100?l磷酸盐缓冲液中，含有50%甘油、1 mg/ml牛血清白蛋白和0.05%叠氮化钠。储存于-20°C，有效期为1年。

特异性：该抗体可通过Western blot、免疫细胞化学和ELISA检测多种磷酸化丝氨酸或磷酸化苏氨酸蛋白。

应用  

Western Blot (WB): 1:500  

酶联免疫吸附试验 (ELISA): 1:1000  

免疫细胞化学 (ICC): 1:50  

免疫沉淀 (IP): 1:50  

上图：Western blot分析：对经100 nM卡里库林A处理30分钟的A431细胞（泳道1和2）以及随后用λ-磷酸酶处理的细胞（泳道3）进行Western blot分析。印迹使用抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸小鼠单克隆抗体以1:250（泳道1）或1:1000（泳道2和3）的比例进行检测。

下图：免疫细胞化学染色：对未处理和经卡里库林A处理的A431细胞进行磷酸化丝氨酸和磷酸化苏氨酸的免疫细胞化学标记。细胞用小鼠单克隆抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸（PM3801）和兔多克隆抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸（PP2551）进行标记，随后使用与Cy3偶联的适当二抗进行检测。

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