ATP酶和GTP酶能够催化ATP或GTP分解为ADP或GDP以及游离磷酸根离子。这些酶在物质运输、信号转导、蛋白质生物合成和细胞分化中发挥着关键作用。BioAssay Systems的QuantiChrom? ATP酶/GTP酶检测试剂盒提供了一种高灵敏度的方法,用于在微孔板格式中测定ATP酶/GTP酶的活性。其专有配方采用单一试剂,在室温下30分钟内即可准确测定酶活性。改进的孔雀石绿试剂与游离磷酸根离子结合形成稳定的深绿色,可在微孔板读数仪(600 - 660 nm)上进行测量。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品atp酶/gtp酶测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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atp酶/gtp酶测定试剂盒 | BAS-DATG-200 | 查看 |
atp酶/gtp酶测定试剂盒主要特点
- 高灵敏度:可检测到0.007 U/L的ATP酶或GTP酶活性。
- 快速便捷:单一试剂,均相“混合即测”检测法可在30分钟内完成酶活性的定量。
- 稳定且适用于高通量筛选:在620 nm处检测可显著减少有色化合物的潜在干扰。在96孔和384孔板中观察到的Z’因子大于0.7。可在高通量筛选液体处理系统上轻松实现自动化。
应用
- 测定ATP酶和GTP酶的活性。
- 药物发现:用于高通量筛选ATP酶或GTP酶抑制剂。
试剂盒内容
- 96孔板检测200次
- 试剂:50 mL
- 检测缓冲液:10 mL
- 标准品:1 mL(1 mM磷酸盐)
储存条件
试剂盒在室温下运输。当储存于4°C时,试剂和标准品可稳定保存一年。
注意事项
试剂含有0.27 M H?SO?。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规安全措施。请参考材料安全数据表以获取详细信息。
重要提示:使用前必须将所有试剂恢复至室温。在每次检测之前,重要的是要检查酶制剂和检测缓冲液中是否含有游离磷酸盐。可以通过将200 ?L试剂加入40 ?L样品溶液中来方便地进行检测。在620 nm处的空白吸光度值应低于0.3。如果吸光度读数高于0.3,请检查磷酸盐水平。实验室清洁剂可能含有高水平的磷酸盐。确保实验室器具在彻底清洗后不被磷酸盐污染。
一般注意事项
材料:使用纯度大于99%的ATP和GTP(例如Sigma A2383-1G)。提供的2倍检测缓冲液含有40 mM Tris、80 mM NaCl、8 mM MgAc?、1 mM EDTA,pH 7.5。也可以使用其他缓冲液(如Hepes、Mes、Mops)。检测与1 mM DTT、2 mM β-巯基乙醇、0.5 mg/mL BSA和5% DMSO兼容。
96孔板中的磷酸盐检测:1. H?O,2. 磷酸盐,3. H?O中的ATP,4. H?O中的ATP/磷酸盐,5、7、9、11、13:检测缓冲液中的ATP,其中标示含有0.5 mg/mL BSA、1 mM DTT、2 mM β-巯基乙醇(βME)和5% DMSO。6、8、10、12、14:检测缓冲液中的ATP/磷酸盐。磷酸盐和ATP的浓度分别为50 ?M和1 mM。检测不受这些成分的影响。
结果示例
在室温下,使用1 mM天冬氨酸对高纯度大肠杆菌天冬酰胺酶的不同量(300 U/L至9.37 U/L)进行了20分钟的检测。
出版物:
1. De Hita, D et al. (2020). Discriminating the short-term action of root and foliar application of humic acids on plant growth: Emerging role of jasmonic acid. Frontiers in Plant Science, 11, 493.
2. Gong, D. et al. (2018). Structure of the human plasma membrane Ca2+-ATPase 1 in complex with its obligatory subunit neuroplastin. Nature communications 9(1):3623.
3. Sasaki, M. et al. (2018). Aciduricity and acid tolerance mechanisms of Streptococcus anginosus. The Journal of general and applied microbiology,2017-11.
4. Xu, X. et al. (2018). The major-effect quantitative trait locus Cs ARN 6.1 encodes an AAA ATP ase domain-containing protein that is associated with waterlogging stress tolerance by promoting adventitious root formation. The Plant Journal, 93(5), 917-930.
5. Yang, X. et al. (2018). Mechanism of ATP hydrolysis by the Zika virus helicase. The FASEB Journal, 32(10), 5250-5257.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。