泛素化——细胞命运的“分子开关
蛋白质泛素化(Ubiquitination)是调控细胞功能的核心翻译后修饰机制之一。通过泛素分子与靶蛋白的共价结合,细胞能够精确控制蛋白质的稳定性、定位及相互作用,进而影响细胞周期、DNA修复、免疫应答等关键生命活动。其中,多聚泛素化链的类型(如K48、K63等)直接决定了蛋白质的命运——K48链通常标记蛋白质通过蛋白酶体降解,而K63链则参与信号转导和炎症反应。
然而,传统泛素化检测方法(如免疫共沉淀、Western Blot)面临诸多挑战:
1、低灵敏度:难以捕获低丰度泛素化蛋白;
2、缺乏特异性:无法区分泛素链类型(如K48 vs. K63);
3、操作繁琐:耗时数天且依赖经验。
针对这些痛点,Lifesensors凭借20余年泛素化研究经验,推出UbiTest™与UbiQuant™系列试剂盒,为科研与药物开发提供一站式解决方案。
使用场景:从基础研究到转化医学的全覆盖
1、癌症研究与靶向治疗开发
K48多聚泛素化异常与肿瘤抑制蛋白(如p53)的降解密切相关,而K63链则驱动NF-kB通路的过度激活。使用K48/K63链特异性UbiTest试剂盒(UM-0414M-1000/UM-0413M-1000),可精准筛选致癌性泛素化靶点,加速小分子抑制剂开发。
2、神经退行性疾病机制解析
阿尔茨海默病中,Tau蛋白的异常泛素化导致神经纤维缠结。UbiQuant™ S Kit(UE-0103-0096)支持靶蛋白泛素化的绝对定量,为疾病标志物发现提供数据支撑。
3、药物毒理学评估
药物诱导的肝毒性常伴随细胞周期蛋白的泛素化失调。通过UbiQuant™ Kit(UE-0101-0096)快速检测总泛素化水平变化,可高效评估化合物安全性。
产品优势:为何选择Lifesensors?
1、特异性与灵敏度双重突破
- UbiTest磁珠TUBE洗脱试剂盒(UM-0411M-1000)采用串联泛素结合实体(TUBE)技术,通过高亲和力泛素结合域捕获多聚泛素化蛋白,灵敏度较传统抗体提升10倍(如图2)。
- K48/K63链特异性试剂盒基于专利抗体,可排除其他泛素链类型(如K11、K29)干扰,特异性>95%。
2、“一步法”操作,省时省力
从样本裂解到泛素化蛋白富集仅需3小时,无需蛋白酶体抑制剂预处理,减少实验变量。
3、兼容性与扩展性兼具
- 适配哺乳动物细胞、组织样本及体外泛素化反应体系;
- 下游可衔接质谱、Western Blot或ELISA,满足多层次分析需求。
核心产品详解
1、UbiTest™磁珠TUBE洗脱试剂盒系列
- 通用型检测(UM-0411M-1000):适用于未知泛素链类型的初筛,可同时捕获K48、K63及其他类型多聚泛素化蛋白。
- 通用型检测(UM-0412M-1000):适用于未知泛素链类型的初筛,可分别分析蛋白质被K48/K63多聚泛素化。
- K48链特异性试剂盒(UM-0414M-1000):专为蛋白质降解研究设计,直接关联蛋白酶体通路活性。
- K63链特异性试剂盒(UM-0413M-1000):聚焦炎症与应激信号,解析TLR/IL-1R等通路调控机制。
Jurkat细胞中蛋白质的泛素化分析。
(A) DUB处理后,A、B、C蛋白信号升高,提示其多泛素化。(B)泛素免疫印迹显示TUBE下拉样品中多泛素被DUB完全消化。用硼替佐米(BTZ)处理Jurkat细胞2小时。细胞在RIPA缓冲液中裂解,缓冲液中添加蛋白酶鸡尾酒抑制剂(Calbiochem, PIC Set V), 50?M PR619 (LifeSensors Cat.# SI9619),和 5 mM o-phenanthroline (LifeSensors Cat.# SI9649)。
货号 | 规格 | 产品名称 |
LSS-UM-0411-3000 | 10 pull-downs | UbiTest Buffers Only |
LSS-UM-0411M-1000 | 10 pull-downs | UbiTest Magnetic TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0411-1000 | 10 pull-downs | UbiTest Agarose-TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0412-1000 | 10 pull-downs | Linkage Profiling UbiTest - Agarose TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0413M-1000 | 10 pull-downs | K63 Linkage Specific UbiTest - Magnetic TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0414-4800 | 10 pull-downs | K48 Linkage Specific UbiTest -Agarose TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0414M-1000 | 10 pull-downs | K48 Linkage-Specific UbiTest - Magnetic TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0412M-1000 | 10 pull-downs | Linkage-Specific UbiTest - Magnetic TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0413-6300 | 10 pull-downs | K63 Linkage Specific UbiTest - Agarose TUBE Elution Kit |
LSS-UM-0420-1000 | 1 Kit | Ubiquitin Mass Spectrometry Kit |
2、UbiQuant?系列:从全局到靶向的定量革命
- UbiQuant? Kit(UE-0101-0096):通过化学发光法检测总泛素化水平,5μL样本即可完成分析,适用于高通量筛选(如图3)。
- UbiQuant™ S Kit(UE-0103-0096):结合免疫磁珠与荧光探针,实现特定靶蛋白(如EGFR、p53)的泛素化绝对定量,CV值<8%。
艾美捷货号 | 规格 | 产品名称 |
LSS-UE-0101-0096 | 1 Plate | UbiQuant? Kit |
LSS-UE-0103-0096 | 1 Kit | UbiQuant? S Kit |
LSS-UE-0901-0096 | 1 Plate | UbiQuant? Plate |
LSS-UE-0901-0384 | 1 Plate | UbiQuant? Plate |
LSS-UE-0903-0096 | 1 Plate | UbiQuant? S Plate |
LSS-UE-0903-0384 | 1 Plate | UbiQuant? S Plate |
LSS-UE-0905-0096 | 1 Plate | UbiQuant? Ultra Plate |
LSS-UE-0905-0384 | 1 Plate | UbiQuant? Ultra Plate |
如何开始您的泛素化研究?
1、明确需求:选择泛素化类型(总泛素化/多聚链特异性)与检测目标(全局/靶蛋白);
2、匹配试剂盒:参考产品详情,或联系Lifesensors/艾美捷技术支持团队获取个性化方案;
3、快速上手:访问官网下载详细Protocol,首次实验成功率>90%。
泛素化研究正从“定性描述”迈向“定量解析”时代。Lifesensors以创新技术为核心,帮助研究者突破检测瓶颈,加速从机制探索到临床转化的每一步。立即联系艾美捷科技订购试剂盒,解锁您的下一个重大发现!